RPA-CRISPR/Cas12a system nyob rau hauv txoj kev tshawb no ua tiav sai (30–40 min), ultra-rhiab (1 daim ntawv / μL) HCMV kuaj pom los ntawm kev tsom mus rau qhov ntxov -qhia UL123 noob, outperforming pa txoj hauv kev kuaj cov qauv kuaj.Qhov kev hloov tshiab no ua rau lub sij hawm qis dua {9} diagnosis{9} Cov kab mob, tshwj xeeb tshaj yog nyob rau hauv cov neeg mob immunocompromised, thiab qhia txog qhov ua tau ntawm CRISPR-raws li kev kuaj mob rau kev txhim kho kev tswj hwm ntawm HCMV- kab mob ntsig txog. Qhov kev ntsuam xyuas qhov yooj yim thiab kev ua tau zoo qhia txog nws lub peev xwm ua ib qho taw qhia - ntawm - cov cuab yeej saib xyuas rau cov peev txheej - qhov chaw txwv.
Cov qauv ntawm RPA amplification sites thiab xaiv cov khoom siv.
(A) RPA primer tsim hais txog qhov chaw ntawm amplification fragments. Cov xib xub qhia lub hauv paus txoj haujlwm los ntawm qhov pib mus rau qhov kawg ntawm cov khoom tawg yooj yim nrog P1-P6 primers.
(B) Cov duab agarose gel electrophoresis ntawm RPA cov khoom lag luam amplified nrog 6 HCMV primer sets.
(C) Kev tshuaj xyuas ntawm qhov ua tau zoo ntawm cov khoom siv RPA los ntawm cov tuam txhab sib txawv. P: Primer, NC: Kev tswj tsis zoo.
Cov txiaj ntsig tau qhia tias cov khoom siv AmpFuture tau nthuav tawm qhov ua tau zoo tshaj plaws.
Kev sib piv ntawm cov txiaj ntsig zoo ntawm MIRA-CRISPR/Cas12a, PCR - Fluorescent Probe Method thiab qPCR hauv cov qauv kuaj.
Peb tau sau cov ntshav thiab zis los ntawm 48 tus neeg mob. Genomic DNA tau muab rho tawm los ntawm cov qauv no siv TIANamp Genomic DNA Kit, thiab cov txiaj ntsig ntawm UL122 kuaj tau raug tshuaj xyuas los ntawm PCR- fluorescent sojntsuam txoj kev. Sib piv peb cov txiaj ntsig nrog kev kuaj mob, peb txoj hauv kev tau txheeb xyuas 6 cov qauv zoo uas tsis zoo hauv kev kuaj mob.
